第(3/3)页

    “很好，那么文库制备这块工作就由鲍勃来负责，梅林你和瑟琳在完成其他步骤之后进行协助就好了。”

    接下来的几天，经过不断的磨合。

    这个四人小团队才逐渐走入了正轨。

    没办法，和陆时羡这种以前熟练掌握过的不一样，在这项技术上，三人几乎是从头开始学习。

    而且就这还只是前置准备工作，就几乎花费了一个星期的时间。

    “你们之前已经知道在片段化操作中，这个过程是随机的，因此可能会出现平齐的末端，也有可能出现不平的末端，因此要进行末端修复，将产生的所有的3'或5'突出黏性末端转化成平末端。”陆时羡正解答着来自鲍勃的问题，

    经过对新技术的不断上手操作，再结合他以前的实验经历，彼此碰撞之下，鲍勃产生了一些疑惑。

    他的问题是：“末端修复加a碱基很好理解，是为了产生粘性末端，但进行接头连接全过程都要用到t4dna聚合酶，让他有些不解。

    这个问题比较基础，只能说鲍勃之前没有留意聚合酶的各种作用。

    但陆时羡也没不耐烦，认真的回答道：“那是因为t4dna聚合酶全程都在起作用，它的原理是不仅能够从5'至3'方向催化合成dna，补平5'突出末端，也具有3'至5'外切酶活性，帮助对3'突出末端进行切平，最后将黏性末端dna片段转变为平末端dna。”

    紧接着，梅林也贡献了一个问题。

    他颇为疑惑地问道：“我们的样本里面含有的rna中最多的是rrna，如果直接对最后得到的rna文库进行测序，那么数据里面可能会存在rrna的测序数据，这个数据我怕会有一些误差啊？”

    陆时羡不断在心中点头。

    梅林能想到这一点，足以见到他思维的连贯性。

    没办法，这个问题确实问的很关键，几乎决定了测序工作成功与否。

    而他之前都没有主动提及这一环，是想着自己亲自上手处理时候在说一下的。

    但现在既然有人说到这，提前一下也不是不行。

    事实上，梅林的判断还是有些保守了。

    

    

    dengbi.net      dmxsw.com      qqxsw.com      yifan.net

    shuyue.net      epzw.net      qqwxw.com      xsguan.com

    xs007.com      zhuike.net      readw.com      23zw.cc


    第(3/3)页